一、藥敏試驗操作步驟1制作待檢菌液
在超凈工作臺內挑取培養18-24h普通營養瓊脂平板上的菌落，懸于含3ml無菌生理鹽水的試管中。混勻后與比濁管比濁，調整濁度至0.5麥氏標準（相當于1-2*10 cfu/ml）。
2接種細菌
在超凈工作臺內用無菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上擠壓去掉多余的菌液，均勻涂抹整個平板表面，最后沿平板內緣涂抹一周（用接種環密集劃線法也可以）。
3貼藥敏片
將涂抹均勻的培養皿底部用記號筆做好標記，眼科鑷子在酒精燈上灼燒滅菌待冷卻后，鑷取各種購買或自制的藥敏片，分別貼于相應的位置上，用鑷子輕輕按壓紙片使藥敏紙片與培養基表面密貼；藥敏紙片應在培養基表面均勻分布，各紙片中心距離大于24mm，紙片距邊緣距離大于15mm，這樣一個直徑90mm的培養皿可貼7個藥敏紙片。
4培養
最后將貼好藥敏紙片的平板倒置放于37℃±1℃恒溫培養箱，培養16-18h后取出觀察結果。
二、結果觀察與判定
1抑菌圈直徑觀察
抑菌圈直徑以肉眼見不到細菌明顯生長的邊緣為限（變形桿菌可蔓延生長至某些抗微生物的抑菌圈內，表現為一種細薄微弱的生長，形成一層明顯的抑制性生長環，對于這種情況應忽略不計；對于磺胺類藥物，應忽略抑菌圈內輕微的細菌生長，少于20%的菌苔，以明顯的邊緣為抑菌圈直徑）。
2根據藥敏片周圍抑菌圈的大小，判定藥物的敏感度
敏感：表示被測菌株所引起的感染可以用常用量該抗菌藥物治愈。
中介：表示被測菌株對常規用藥體液或組織中的藥物濃度的反應率低于敏感菌株，使用高于正常給藥量有療效。
耐藥：表示被測菌株不能被常用劑量藥物抑制，臨床療效不佳。
3判定
不同菌株結果判定標準不同；不同藥物判定標準不同。最終判定結果應以WS/T125-1999列表中對應的標準為準。
備注：商品要通常按照說明書用量原倍配置藥敏紙片，可視情況做 2 倍、4 倍濃度配置；商品藥敏感性判定通常Φ﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感；某些原料藥按國標規定判定，沒有具體依據的通常也按照﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感判定；
可以用
抑菌圈測量儀自動測量抑菌圈大小以及自動判定結果。